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電阻抗技術(shù)
Ur,A.等于70年代初期,曾發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)旺盛的細(xì)菌培養(yǎng)物中出現(xiàn)電阻抗變化,其變化隨著
培養(yǎng)時(shí)間的增長(zhǎng)而下降,從而提出了應(yīng)用電阻抗技術(shù)鑒定標(biāo)本中的細(xì)菌。
(一) 電阻抗技術(shù)的基本原理 電阻抗(electrical impedance)是指在交流電路中,導(dǎo)電
物質(zhì)對(duì)電流所產(chǎn)生的阻礙和抵抗作用。它是由電阻性(retistive)成分和電抗性(reactive)成分組成的一種復(fù)合能量。一般而言,細(xì)菌可使培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)、碳水化合物和類(lèi)脂等電惰性底物分解為氨、乳酸鹽、醋酸鹽和重碳酸鹽等電活性代謝產(chǎn)物。當(dāng)細(xì)菌生長(zhǎng)旺盛時(shí),培養(yǎng)基中大量的電惰性分子即可轉(zhuǎn)變?yōu)樵S多電活性分子和離子,從而使培養(yǎng)基中的導(dǎo)電性增大,培養(yǎng)物的電阻抗則隨之降低。因此電阻抗測(cè)定技術(shù),實(shí)際上是測(cè)量細(xì)菌代謝活性的一種方法。由于細(xì)菌種類(lèi)不同,在培養(yǎng)基上產(chǎn)生的代謝物的活性也不一樣,從而成為應(yīng)用電阻抗技術(shù)鑒定細(xì)菌的依據(jù)。
(二) 電阻抗技術(shù)的應(yīng)用 這一測(cè)量技術(shù)自1975年由Ur,A.等提出后,目前認(rèn)為它在以下兩方面的應(yīng)用是有意義的:
1. 細(xì)菌鑒定 利用電阻抗技術(shù)測(cè)量許多細(xì)菌在特殊培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)狀況,可以迅速地獲得各種細(xì)菌特征性的曲線(xiàn)圖。到目前為止,利用這種方法已初步對(duì)腸道桿菌科中的各屬細(xì)菌、假單胞菌、類(lèi)桿菌、梭狀芽胞桿菌、葡萄球菌和乳酸桿菌進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果表明,這些細(xì)菌的培養(yǎng)物均能產(chǎn)生特征性的電阻抗變化,由此而對(duì)細(xì)菌作出鑒定。
2. 菌血癥檢測(cè) 及時(shí)而準(zhǔn)確地從菌血癥患畜體內(nèi)檢出病原菌,可為臨床提供有效的治療依據(jù),但應(yīng)用常規(guī)方法目前還難以于48小時(shí)內(nèi)報(bào)告檢驗(yàn)結(jié)果,因此提供一種快速、敏感而簡(jiǎn)便的血標(biāo)本培養(yǎng)物檢測(cè)技術(shù),也是微生物檢驗(yàn)室所需要解決的問(wèn)題之一。Hadiy等采用Bactometer32研究發(fā)現(xiàn),該法至少可檢出每毫升血液中含0.1CFU(菌落形成單位)。
另外,電阻抗技術(shù)還可以快速測(cè)定飲水、處理后的污水流出物、污染的河水、廢水等各種水源中的大腸桿菌及細(xì)菌的含量等。
(三) 電阻抗技術(shù)的特點(diǎn) 主要有以下四點(diǎn):
1. 特異性 以該技術(shù)測(cè)定細(xì)菌培養(yǎng)物電阻抗的變化時(shí),可以獲得各種細(xì)菌的所謂“指紋圖"或描繪出特征性的曲線(xiàn)圖。根據(jù)目前報(bào)道的材料看,不少細(xì)菌均有自身//的曲線(xiàn)圖,因此用本法鑒定某些細(xì)菌是準(zhǔn)確的。
2. 敏感性 每毫升含103個(gè)細(xì)菌時(shí),其代謝產(chǎn)物的活性于2小時(shí)內(nèi)即可檢出,如每毫升的含菌數(shù)達(dá)105個(gè)時(shí),其細(xì)菌的代謝活性產(chǎn)物于數(shù)分鐘內(nèi)即可檢出。因?yàn)閷?shí)際測(cè)量用的標(biāo)本量為0.1ml,所以該法的實(shí)際敏感性為檢出每毫升含100個(gè)細(xì)菌的活性。
3. 重復(fù)性本法具有較高的重復(fù)性,不因操作人員的更換,或被檢標(biāo)本批次的不同,而報(bào)告出不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 快速性報(bào)告結(jié)果的速度取決于被檢培養(yǎng)物中的活細(xì)菌數(shù)量,并與細(xì)菌的接種量呈正比,即接種量愈大,出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)的速度愈快。如利用該法檢測(cè)大腸桿菌、綠膿桿菌、糞鏈球菌和金黃色葡萄球菌時(shí),當(dāng)接種量為每毫升含103~105個(gè)細(xì)菌時(shí),一般于2小時(shí)測(cè)出,丙酸桿菌和產(chǎn)黑色素桿菌于每毫升培養(yǎng)基中若接種10~15個(gè)細(xì)菌時(shí),其檢出時(shí)間則需48小時(shí)。此法通常較放射法快4~6倍,較常規(guī)法快10倍以上。
本法不足之處是與常規(guī)法獲得的結(jié)果有時(shí)不一致,不能--將標(biāo)本中存在的污染細(xì)菌與被檢的病原菌之間**區(qū)分開(kāi)。