人葉酸受體ELISA檢測試劑盒標本要求有哪些呢
人葉酸受體ELISA檢測試劑盒對體外培養(yǎng)的人血清、血漿、細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清和卵泡液中的folr1進行定量分析。預包被抗體為folr1多克隆抗體。檢測相抗體為folr1多克隆抗體，生物素標記。
將樣品和生物素標記抗體依次加入平板孔中，用PBS或TBS洗滌。加入過氧化物酶標記的親和素反應，用PBS或TBS洗滌后，用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍色，在酸的作用下轉(zhuǎn)化為黃色。顏色與folr1呈正相關(guān)。
Folr1，也稱為fol受體α。成熟folr1是一種固定在細胞表面的N-糖基化蛋白。Folr1主要存在于上皮細胞中，可溶性Folr1可從細胞表面脫落進入血液和乳汁。
人葉酸受體ELISA檢測試劑盒標本要求如下：
1、血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2、血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3、組織勻漿：用預冷的PBS（0.01M，pH=7.4）沖洗組織，除去殘留的血液（勻漿中溶解的紅細胞會影響測量結(jié)果），稱重后切成塊。PBS的體積為1:9，例如，1g組織樣品相當于9mlPBS。具體體積可根據(jù)實驗需要調(diào)整并記錄。建議在PBS中加入蛋白酶抑值劑（PPI），加入玻璃均質(zhì)機中，在冰上研磨。為了進一步溶解組織細胞，可以用超聲波破碎或反復凍融。取勻漿5000×g離心5～10min，檢測上清液。
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